Uso de un bacteriofago comercial para la detección de dos micobacterias, mycobacterium bovis y mycobacterium avium subesp paratuberculosis

Abstract

La tuberculosis bovina (TB) causada por Mycobacterium bovis y la paratuberculosis (PTB) producida por Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (MAP) son enfermedades comunes de rumiantes que generan un impacto en la salud pública y en la economía la industria ganadera. La prueba de oro en el diagnóstico de la TB y PTB es la bacteriología, sin embargo, se requiere el tiempo prolongado, hasta 2 - 6 meses o más, para obtener resultados. En este trabajo se implementó una técnica alternativa para la detección rápida de estas micobacterias utilizando un bacteriófago lítico comercial (Actiphage). Se detectó M.bovis solo en la muestra control positivo y hasta la fecha ninguna muestra de sangre de bovinos lecheros reactores (N=59) resultó positivo. No se logró estandarizar el protocolo para la detección del MAP en leche, por posibles pérdidas de la micobacteria indicador (M. smegmatis) y/o el fago activo, por lo que se buscó desarrollar la técnica convencional del PCR modificando los métodos anteriormente publicados. La leche del estanque del establo del IICV fue libre del ADN del MAP, mientras una muestra de leche comercial resultó positiva. La técnica del PCR servirá para evaluar el nivel de antígeno del MAP en productos lácteos, y así evitar el riesgo de enfermedades inmunomoduladores como la Enfermedad de Crohn. Aunque el uso del fago lítico pudiera ser una herramienta ante mortem para confirmar la septicemia de TB y PTB, se sugiere usar en combinación con otras pruebas para complementar el diagnóstico.